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鸟氨酸脱羧酶肉汤生化管使用方法

李令梅
录入时间:2023-4-11 13:39:27 来源:青岛银河澳门官网入口

一、培养基用途:

  用于细菌鸟氨酸脱羧酶试验。


二、原理:

  某些细菌可产生赖氨酸脱羧酶,使鸟氨酸脱去羧基,生成腐胺,从而使培养基变碱性并通过指示剂变色来观察。脱羧酶是适应酶或称诱导酶,对底物有特异性,在无相对氨基酸的培养基中不产生此酶,并且需要酸性环境和适宜温度。故在培养基中加入葡萄糖,使细菌发酵葡萄糖产酸,以利于脱羧酶的产生。氨基酸的分解是在厌氧条件下进行,故在培养基表面加液体石蜡。由于细菌发酵葡萄糖产酸,在培养初期培养基和对照培养基呈黄色,继续培养时,若氨基酸经脱羧或水解产生胺类则培养基变碱,呈紫色或紫红色,即为阳性反应;如至培养末期培养基如同对照管一样均呈黄色,则判为阴性反应。


三、培养基成分

成分

含量(g/L)

蛋白胨

5.0

鸟氨酸

5.0

葡萄糖

1.0

酵母浸粉

3.0

溴甲酚紫

0.016

pH 6.8±0.1 25℃


四、操作方法

  1、用磨砂轮在安瓿瓶颈部划线一圈,掰开待用;倾注平皿备用。

  2、将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法,制备成5 McFarland浊度(约109CFU/ml)的菌悬液;

  3、吸取0.05ml-0.08ml(约1-2滴)菌悬液至鸟氨酸脱羧酶生化管和氨基酸脱羧酶试验对照生化管,36±1℃培养24±2h后,观察试验结果。


五、实验结果

质控菌株

菌株编号

生长情况

其他特征

福氏志贺氏菌

ATCC12022

+++

阴性,黄色

宋内志贺氏菌

CMCC(B)51592

+++

阳性,紫色

痢疾志贺氏菌

CMCC(B)51252

+++

阴性,黄色

大肠埃希氏O157菌

ATCC35150

+++

阳性,紫色

坂崎肠杆菌

ATCC29004

+++

阳性,紫色

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC14028

+++

阳性,紫色

普通变形杆菌

CMCC(B)49027

+++

阴性,黄色


鸟氨酸脱羧酶肉汤GS012中


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注:本文属银河澳门官网入口原创,未经允许不得转载。

 

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