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KF链球菌琼脂(含TTC)的原理和使用方法

张宇名
录入时间:2023-3-13 10:35:17 来源:青岛银河澳门官网入口

一、用途及试验原理

  本培养基用于粪链球菌选择性分离培养及计数。

  䏡蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子;麦芽糖、乳糖为可发酵糖类;甘油磷酸钠为培养基碳源,也起到一定的缓冲作用;氯化钠维持细菌平衡的渗透压;叠氮钠可抑制革兰氏阴性菌生长;溴甲酚紫为指示剂染料;琼脂是凝固剂。粪链球菌能将TTC(氯化三苯基四氮唑)还原成一种酸性的偶氮染料,显示为深红色菌落。


二、培养基配方(g/L)

䏡蛋白胨

10.0

酵母浸粉

10.0

甘油磷酸钠

10.0

氯化钠

5.0

麦芽糖

20.0

乳糖

1.0

叠氮钠

0.4

琼脂

13.0

溴甲酚紫

0.015

TTC

0.1

pH 7.2±0.2(25℃)


三、试验方法

  1、称取本品69.5g,加热溶解于1000 mL蒸馏水中,煮沸搅拌至完全溶解,冷至50℃左右,倾入无菌平皿,备用。

  2、制备菌种悬液,接种到KF链球菌琼脂(含TTC)上。

  3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养48h。


四、质控结果

  接种以下质控菌株,放置36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养48h。菌株培养结果见图1。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

回收率

生长情况

其他特征

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

100-1000

/

-

抑制

金黄色葡萄球菌

ATCC 6538

100-1000

/

-

抑制

粪肠球菌

ATCC 29212

10-100

≥70%

+++

红色菌落


KF链球菌琼脂(含TTC)的微生物质控结果

图1 KF链球菌琼脂(含TTC)的微生物质控结果


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