一、试验用途及原理
本培养基用于粪肠球菌选择性分离培养。
䏡胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子；麦芽糖、乳糖为可发酵糖类；甘油磷酸钠为培养基碳源，也起到一定的缓冲作用；氯化钠维持细菌平衡的渗透压；叠氮钠可抑制革兰氏阴性菌生长；溴甲酚紫为指示剂染料；琼脂是凝固剂。粪肠球菌能将TTC（氯化三苯基四氮唑）还原成一种酸性的偶氮染料，显示为深红色菌落。
二、培养基配方（g/L）
|
䏡胨 |
10.0 |
|
麦芽糖 |
20.0 |
|
酵母浸粉 |
10.0 |
|
甘油磷酸钠 |
10.0 |
|
氯化钠 |
5.0 |
|
乳糖 |
1.0 |
|
溴甲酚紫 |
0.015 |
|
叠氮钠 |
0.4 |
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TTC |
0.1 |
|
琼脂 |
13.0 |
|
pH7.3±0.2（25℃） |
|
三、试验方法
1、称取本品70.0 g，加热溶解于1000 mL蒸馏水中，煮沸5分钟，冷至50℃左右，倾入无菌平皿，备用。
2、制备菌种悬液，接种到粪肠球菌琼脂培养基上。
3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中，需氧培养48 h。
四、质控结果
接种以下质控菌株，放置36℃±1℃恒温培养箱中，需氧培养48 h。菌株划线培养结果见图1，菌株涂布培养结果见图2。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
|
粪肠球菌 |
ATCC 29212 |
10-100 |
≥50% |
+++ |
淡红色小菌落 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
/ |
/ |
- |
抑制 |
|
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
/ |
/ |
- |
抑制 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
/ |
/ |
- |
抑制 |
图1 粪肠球菌琼脂培养基的微生物质控结果（划线培养）
图2 粪肠球菌琼脂培养基的微生物质控结果（涂布培养）
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