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分批培养



录入时间:2023-1-28 9:40:21 来源:青岛银河澳门官网入口

  微生物在化学成分一定的培养基中进行培养称为分批培养或间歇培养。它是一个封闭体系,初始状态下含有限养物和微生物。微生物在分批培养中的生长速度随时间而发生有规律性的变化。


(1)细菌的生长曲线

  在细菌分批培养中,定时取样测定单位体积里的细胞对数为纵坐标,以培养时间为横坐标,就可得到细菌繁殖曲线。细菌是单细胞微生物,细菌的繁殖也就是群体的生长,所以繁殖曲线又称生长曲线。

  根据细菌生长曲线的变化规律,可把分批培养的全过程分为四个阶段:延迟期,对数生长期、稳定期、衰亡期。

  ① 延迟期 当微生物进入一个新的培养环境时,一般并不立即进行繁殖,而是需要一个从微生物接种到培养基后的适应期。在开始一段时间内,细菌数或总重量几乎不增加,甚至还稍有减小,所以将这个时期称为延迟期。此时,菌体需要重新调整分子组成,包括酶和细胞结构成分,所以,又将这个时称为调整期。

  ② 对数生长期 延迟期末,细菌已适应了新环境,细胞开始分裂,并以几何级数增长这一时期称为对数生长期。微生物在这个时期,生长非常旺盛,故又称生长旺盛期。细菌细胞数接近数学公式措述的理想生长状态。此阶段的生长曲线趋于直线。

  ③ 稳定期又称恒定期或最高生长期 当营养物质的消耗尤其是限制性营养物耗尽或营养物比例失调(如C/N改变),酸、醇、毒素和过氧化氢等有害代谢产物的积累,以及其他环境条件(如pH、氧化还原电位等)发生对菌体生长不利的变化时,在对数期末期,菌体生长速率就会逐渐下降,细胞分裂速度也逐渐下降,而死亡速率上升,以致出现繁殖率与死亡率逐渐趋于平衡,活菌数基本保持稳定的阶段,这一时期称为稳定期。

  ④ 衰亡期 若将稳定期后期的菌体继续培养,细胞死亡逮率将进一步上开,以致明显超过繁殖速率,体系中活菌明显下降,就达到了衰亡期。若其中活菌数以几何数下降,称为对数衰亡期。


(2)丝状直菌的生长曲线

  菌丝状微生物(放线菌、霉菌等)的生长线与单细胞微生物存在显著的不同,它们一般没有典型的对数生长期。丝状真菌的生长过程大致可以分为三个阶段:生长停滞期,迅速生长期,衰亡期。

  ① 生长停滞期 造成生长停滞的原因有两一是孢子萌发前真正的停滞状态,另一种情况是生长已经开始但还无法测定。

  ② 迅速生长期 此时菌丝体干重迅速增加,其立方根与时间呈直线关系。因为它不是单细胞,繁殖不是以几何级数倍增,所以,它没有对数生长期在迅速生长期中,碳、氮、磷等被迅速利用,呼吸强度达到顶峰。有些代谢产物已出现,有些还未出现。

  ③ 衰亡期 真菌进入衰亡期的标志是菌丝体干重下降,一般是在短期内失重很快,以后不再变化。大多数次级代谢产物(如抗生素)在此时合成。处于衰亡期的大多数细胞都出现大的空泡。菌体自溶的程度因菌种和培养条件而异。

 

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