(1)硬质和干制产品
为防止产生过热的情况﹐此类产品不得在旋转式均质仪中单次均质2.5min以上。同样为避免操作导致过热,需先行磨碎或切碎的实验室样品,每次切割和研磨的时间不得超过1min。
试料添加稀释液或悬浮液后,建议在实验室环境温度(18℃~27℃)选放置最长1h复苏,以助因加工损伤的微生物从硬质和干性产品中恢复生长。
(2)脱水的和其他低水分产品
粉末状产品应使用无菌器具将其在容器中彻底混合,其他产品在制样前可能需要使用灭菌工具粉碎或切碎至小块,然后称重。对低水分产品,准确的量取稀释液很重要,应尽量缓慢的使用样品复水,以减少因渗透压休克而导致的目标微生物死亡,低水分产品可能需要浸泡在稀释液中一段时间(最多1h)后再均质及后续炒作,研究发现与振摇处理法相比,采用浸泡法缓慢水化会使脱水食品中的沙门氏菌有更高的复苏比率。
对可溶解完全的粉状产品,无须进一步均质,仅需选取适当的温度和静置时间,以利于某些样品(如可可粉﹑奶粉)的悬浮即可;对具他溶解性较差或非粉末状的产品,可应用旋转式均质仪或蠕动式均质器来制备初始悬行队;对于可能在水中膨胀的产品(如多糖和凝胶、脱水的荷兰芹或香葱等),可适当进一步稀释为20倍、50倍或100倍,直至获得合适的悬浮液,但需记录使用的额外稀释液量﹐以保证计数检测结果的正确计算;也可向初始悬浮液中加入特定的酶溶液以使某些物质的溶解度得到改善﹐例如:适用的酶和对应的基质为1%(体积分数)α-淀粉酶用于溶胀类的淀粉制品、谷物和谷物制品;1%(体积分数)纤维素酶用于羧甲基纤维素、刺槐豆、角瓜、瓜尔胶和桂皮胶;2%(体积分数)木瓜蛋白酶用于明胶。
(3)液体和非黏性产品
试料称量前,应徒手或机械振摇(如以25cm为幅度振摇25次)实验室样品﹐以确保目标微生物在其中分布均匀。
(4)酸性产品
制备酸性产品的稀释液或悬浮增菌液时,应将pH值调节回中性区域(pH7.0±0.5)或适合目标微生物生长的范围。缓冲蛋白胨水(BPW)适用于大多数pH≥4.5的产品,而对酸度更高些的(如pH≥3.5)产品,可使用双料的缓冲蛋白胨水来调节。初次检测此类样品时,宜核查稀释液或悬浮增菌液pH值以确保其在规定范围之内。
检测酸性产品时,还应考虑检测目的和产品的最终用途。例如对高酸性产品(pH<3.5),如水果,果汁.醋和酸菜等,若为检测耐酸性和嗜酸的腐败微生物,采用合适的培养基即可,这些样品的pH无需调整。而对于那些在非选择性(预)增菌液的培养过程中酸度会持续增加的样品,如含活乳酸菌的酸奶及类似产品,在培养过程中可能使 pH值降低,因此需要监控(预)增菌液的pH以使其维持在4.5以上,可采用增加缓冲液容量的方法,但须验证这种增菌条件符合特定目标微生物的生长需求。
(5)高脂肪含量(>20%)食品
对此类样品,应根据其大致的脂肪含量水平,在制备时应使用含1g/L~10g/L的吐温80的稀释液﹐促使悬浮液乳化和均匀分布。通常,每10%脂肪使用1g/L浓度的吐温80,如脂肪含量40%的样品,吐温80添加量为4g/L。也可使用其他适宜的表面活性剂和乳化剂,但使用比例应经实验确定。
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