可溶性抗原(如细菌浸出液、外毒素、组织浸 出液、动物血清等 )与相应的抗体发生结合,在 电解质的参与下,经过一定时间形成 肉眼可见的沉淀物,称为沉淀反应。反应中的抗原称为沉淀原,抗体称为沉淀素。
(1)环状沉淀反应 .
在小口径试管(内径2—3mm)内,先加入含已知抗体的血清,然后沿管壁徐徐加入待检抗原,使之重叠于血清上面(勿使两者混合)。静置于室温数分钟后,两层液面交界处出现乳 白色沉淀环,为阳性反应。
此法比较简便、敏感,可用于检查未知抗原,如检测炭疽杆菌 的耐热多糖类抗(ASCOLI氏试验)、血迹来源等。
(2)絮状沉淀反应
将抗原和相应抗体在试管中或凹玻片上混匀,出现肉眼可见的絮状沉淀颗粒,为阳性反应,如辅助诊断由螺旋体引起的梅毒病的康氏反应。
(3)琼脂扩散反应
可溶性抗原和抗体在半固体琼脂内扩散,进行沉淀反应,称琼脂扩散反应。琼脂扩散可分为单向琼脂扩散和双向琼脂扩散两种类型。
①单向琼脂扩散——将一定浓度的抗体与半固体琼脂混合,倾注于平皿或玻片上。 凝固后,在琼脂层打孔,再将抗原加入孔中,使其向四周扩散,一定时间后在比例适当处形成肉眼可见的环状沉淀线。
该反应也可在试管内进行。
②双向琼脂扩散——将半固体琼脂倾注于平皿或玻片上。待凝固后,在琼脂上按一定距离打数个孔,然后将抗原与抗体分别注入小孔内,两者互相呈放射状扩散。一定时间后,相应的抗原抗体在浓度最适当的地方出现白色沉淀线。
该反应也可在试管中进行。但要注意的是,半固体琼脂要放在抗体与抗原之间。
琼脂扩散反应和电泳技术结合起来,进一步发展为免疫电泳技术。免疫电泳技术由于具体操作的不同,又可分成许多种方法,如对流免疫电泳、“火箭”免疫电泳、抗原一 抗体交叉免疫电泳等。
琼脂扩散反应在实践中应用很广,主要用于抗原抗体成分的研究、生物制品的纯度分析、某些疾病的临床诊断。
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