一、用途
用于创伤弧菌的分离培养。参考标准《GB 4789.44-2020食品安全国家标准 食品微生物学检验 创伤弧菌检验》
二、原理
蛋白胨、牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;纤维二糖为可发酵的糖类;多粘菌素E能抑制副溶血性弧菌和溶藻弧菌等非目标菌的生长;溴麝香草酚蓝和甲酚红为混合pH指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。
创伤弧菌可发酵纤维二糖使培养基PH下降,菌落呈现黄色。霍乱弧菌不发酵纤维二糖,生长过程中产生的碱性物质使培养基PH升高呈现紫色。其余常见干扰菌如大肠杆菌、副溶血性弧菌则被多粘菌素E抑制。
三、成分(g/L)
蛋白胨 |
10.0 |
牛肉浸粉 |
5.0 |
氯化钠 |
20.0 |
溴麝香草酚蓝 |
0.04 |
甲酚红 |
0.04 |
琼脂 |
15.0 |
pH 7.6±0.1 25℃ |
四、用法
称取本品50.0g,加热煮沸溶解于900ml 蒸馏水中,分装每瓶90ml,冷却到 48-55℃时,加入10% 纤维二糖溶液10ml和1支CC琼脂添加剂(多粘菌素 E40000units)混匀,倾入无菌平皿,无需高压灭菌。
培养基的加热灭菌操作视频:点击查看
若加热灭菌操作不规范,则会影响培养基使用效果
五、试验现象
接种以下质控菌株,在36±1℃培养18-24小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比培养基 |
方法 |
质控结果 |
其他特征 |
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
抑制 |
霍乱弧菌 |
/ |
/ |
/ |
定性 |
/ |
紫色菌落 |
创伤弧菌 |
ATCC27562 |
20-200 |
3%NaCl TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
圆形扁平,中心不透明,边缘透明的黄色菌落 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
抑制 |
CC琼脂培养基微生物质控结果
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相关标准:
GB 4789.44-2020 食品微生物学检验 创伤弧菌检验 -标准下载
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