一、试验原理:
胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖提供碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;柠檬酸铁铵、硫酸镁、硫酸锰、硫酸亚铁、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,吐温80为乳酸杆菌提供所需的代谢脂肪酸;柠檬酸铁铵和乙酸钠能够抑制一些杂菌的生长,包括链球菌、霉菌和除乳酸杆菌外的大多数口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑制了其它细菌的生长,有利于乳酸杆菌的分离;琼脂是培养基的凝固剂。
二、用途:
用于乳酸杆菌的分离培养。
三、培养基配方(g/L):
酵母浸粉 |
5.0 |
胰酪蛋白胨 |
10.0 |
磷酸二氢钾 |
6.0 |
硫酸亚铁 |
0.034 |
硫酸镁 |
0.575 |
葡萄糖 |
20.0 |
乙酸钠 |
25.0 |
柠檬酸铵 |
2.0 |
硫酸锰 |
0.12 |
琼脂 |
15.0 |
pH 5.5±0.2 25℃ |
四、试验方法:
1.称取本品84.0g,再吸取吐温80 1ml和冰乙酸1.3ml,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,当日使用,无需高压灭菌。次日使用,需118℃高压灭菌15分钟。倾注无菌空平皿备用。
注:该培养基溶解后有少量沉淀。
2.制备质控菌液。
3.选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。
4.36±1℃培养24-48小时,记录实验结果。
五、结果观察与解释
接种以下质控菌株,在36±1℃培养24-48小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
嗜酸乳杆菌 |
CICC6005 |
20-200 |
MRS培养基 |
定量 |
PR≥0.7 |
白色突起菌落 |
植物乳杆菌 |
ATCC8014 |
20-200 |
MRS培养基 |
定量 |
PR≥0.7 |
白色突起菌落 |
|
|
植物乳杆菌ATCC8014 白色凸起菌落 |
嗜酸乳杆菌CICC6005 白色凸起菌落 |
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