固体培养,就是利用固体培养基进行微生物的繁殖,由于微生物贴附在营养基质表面生长,所以又称表面培养。实验室固体培养方法用于菌种的分离、纯化、保藏和生产种子的制备,常见方法如下
1、适用于好氧和兼性好氧微生物的培养
(1)平板划线培养方法:
用接种针蘸取菌样;在平板固体培养基表面划线。
(2)平板涂布培养法:
用涂布棒将少量的液体培养物涂布在整个固体培养基表面。
(3)将少量液体培养物与融化后降温至46~50℃的固体培养基混匀,倒入培养皿中,浇注成平板。接种后的培养物直接放入培养箱中恒温培养。
(4)斜面接种培养法:
接种针火焰灼烧灭菌;管口置近火怕处;用接种针随取幽样后,移到斜面上划线。接种后的培养物直接放入培养箱中恒温培养。
2、适宜于微好氧微生物生长
穿刺接种:玻管中加入固体培养基,灭菌后将蘸取菌样的穿刺接种针(头部无环)垂直插人固体培养基内,再原路拔出。然后塞上橡皮塞。越靠近培养基深处越缺氧,生长的菌厌氧程度越高。
3、适用于厌氧菌培养
(1)在斜面接种后,将培养管棉塞上部截去或用火点着烧掉,用玻璃棒将管内部分的棉花压至离培养基1cm处,棉塞上方再压入一含水的脱脂棉,加入1:1比例混合的焦性没食子酸和碳酸的粉未,立即加上橡胶塞。焦性没食子酸和碳酸钠在有水的情況下,缓慢作用,吸收氧气,放出CO2造成无氧环境。
(2)将厌氧微生物固体培养物放在真空干燥器内,用泵排出其中的空气,并可进一步向其中充人氮气或95%氮气和5%二氧化碳的混合气体,再放置一定的温度环境中培养。
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