【原理】
哺乳类动物的补体可以和家兔、羊、人等哺乳类的抗体与抗原的复合物结合,因此,以荧光素标记补体的抗体,就可间接指示抗原抗体反应,这种方法也相应地称为抗补体荧光抗体染色法,其优点是以一种抗补体荧光抗体可以检测所有哺乳类的抗体抗原反应系统。
【制法】
(1)从豚鼠血浆中提取补体。由于补体是由18种蛋白质组成的复杂系统,其中以补体3(C3)的含量最高,达1500μg/ml,几乎占全部补体成分的一半,又由于C3是抗原抗体复合物激活的效应物并且有良好的耐热性,一般常提取C3 (B1球蛋白)作为免疫原。
(2)以C3作免疫原免疫家兔或山羊,制备抗补体抗血清。
(3)从上述抗血清中提取免疫球蛋白G(IgG)。
(4)以荧光素标记上述IgG,分离纯化鉴定。)
【用途】
在微生物学中主要用来检测病毒。
【注意事项】
(1)补体最好从豚鼠中提取,因豚鼠血清中补体含量较高。
(2)试验时补体可和已知抗体按一定比例混合与待测微生物或其抗原成分反应,反应完成后以水清洗去除未反应的抗体和补体,然后再加抗补体荧光抗体。
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