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却普曼琼脂培养基原理及现象

纪旭艳
录入时间:2022-5-24 14:45:10 来源:青岛银河澳门官网入口

一、用途及原理

  该培养基用于金黄色葡萄球菌的检测。

  蛋白胨、酵母浸粉提供细菌生长所需的基本营养,磷酸氢二钾为缓冲剂,甘露醇为可发酵碳源,较高浓度的氯化钠可抑制不耐盐细菌的生长,高浓度的硫酸铵可使明胶发生沉淀析出,培养基呈不透明状。金黄色葡萄球菌可耐高渗环境,能在此培养基中生长,将不溶性大分子的明胶分解为小分子可溶性的氨基酸,菌落周围的培养基变为透明状。金黄色葡萄球菌还可分解培养基中的甘露醇产酸,培养结束后,滴加酸碱指示剂可观察产酸现象。


二、培养基配方(g/L)

蛋白胨

10.0

酵母浸出粉

2.5

磷酸氢二钾

5.0

明胶

30.0

甘露醇

10.0

氯化钠

55.0

硫酸铵

75.0

琼脂

15.0

pH

7.2±0.2


三、配制方法

  称取本品202.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15min,冷却至45-50℃左右时,倾入无菌平皿,备用。

  注:培养基中含有较多的明胶及硫酸铵,灭菌冷却后应摇匀立即在阴凉环境倒平板,使平板能够快速凝固,制成的平板应为均一浑浊不透明状态。不可长时间在50℃左右保温,培养基易凝固;倾注平板前必须摇匀且能保证倒好的平板能快速凝固,若制成的平板呈透明状态,通常是因培养基未摇匀或凝固过慢导致的。


四、生长现象及结果观察

  接种以下质控菌株,在36±1℃下培养18-24小时:

质控菌株

菌株编号

生长情况

其他特征

金黄色葡萄球菌

ATCC25923

+++

菌落周围有透明环,产酸

表皮葡萄球菌

CMCC26069

+++

菌落周围有透明环,不产酸




表皮葡萄球菌
金黄色葡萄球菌

  发酵甘露醇产酸现象观察:用棉签除去平板上的菌落,在琼脂表面滴加0.04%溴甲酚紫溶液,可同时在无菌落生长的空白位置加1滴做为对照,若滴加的溴甲酚紫变黄,说明该菌可发酵甘露醇产酸。



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