一、实验用途及原理:
用途:用于沙门氏菌和志贺氏菌的分离培养。
原理:牛肉浸粉、肉蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子;乳糖为可发酵糖,柠檬酸钠、柠檬酸铁为可利用碳源;琼脂是培养基的凝固剂;中性红为酸碱指示剂;脱氧胆酸钠抑制革兰氏阳性菌的生长。发酵乳糖产酸的细菌菌落为红色,不发酵乳糖的细菌菌落为无色;琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L):
牛肉浸粉 |
10 |
肉蛋白胨 |
10 |
乳糖 |
10 |
柠檬酸钠 |
20 |
柠檬酸铁 |
1.0 |
脱氧胆酸钠 |
5.0 |
琼脂 |
13.5 |
中性红 |
0.02 |
pH 7.1-7.5 25℃ |
三、实验方法:
称取本品69.52克,加热溶解于1000 mL蒸馏水中,煮沸1分钟,冷至50℃左右倾入无菌平皿,无需高压灭菌。
使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。
1、制备质控菌液。
2、将质控菌液涂布或划线平板。
3、30℃-35℃倒置需氧培养18小时-24小时,记录实验结果。
四、结果判定:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
福氏志贺氏菌 |
ATCC 12022 |
10-100 |
+++ |
无色透明菌落 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
10-100 |
+++ |
无色透明菌落 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
100-1000 |
+++ |
抑制 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 8739 |
/ |
+++ |
粉红色菌落,有胆盐沉淀 |
图1脱氧胆盐柠檬酸盐琼脂培养基微生物质控结果
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