一、试验原理:
用于阪崎杆菌的山梨醇生化实验。
酪蛋白(酶消化)提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;D-山梨醇作为仅有的碳源。若细菌能发酵D-山梨醇,则产酸使溶液pH下降,酚红指示剂颜色变黄;若不能发酵D-山梨醇,则溶液颜色不变。
二、培养基配方(g/L):
酪蛋白(酶消化) |
8.75 |
氯化钠 |
4.375 |
酚红 |
0.0175 |
D-山梨醇 |
10.0 |
pH7.4±0.1 25℃ |
三、试验方法:
1. 将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法,制成5McFarland浊度(约109CFU/ml)的菌悬液。
2. 吸取0.05-0.08ml(约1-2滴)至生化管内,30±1℃培养24±2h后,观察结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,30±1℃培养24±2h:
质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
其他特征 |
阪崎肠杆菌 |
ATCC29544 |
+++ |
阴性,颜色不变 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
+++ |
阳性,变黄 |
大肠埃希氏O157菌 |
ATCC35150 |
+++ |
阴性,颜色不变 |
肺炎克雷伯氏菌 |
CMCC(B)46117 |
+++ |
阳性,变黄 |
宋内志贺氏菌 |
CMCC(B)51592 |
+++ |
阴性,颜色不变 |
图1-1 D-山梨醇微生物质控结果
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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