1、转化
转化首先是在肺炎链球菌中发现的。它是证明DNA是遗传物质的第一个最有力的证据。所谓转化,就是受体细胞直接吸收了供体细胞的部分DNA,并与本身DNA在同源区进行交换重组,从而使受体细胞具有供体细胞这些基因性状的现象。转化一般只发生在同一物种或近缘物种之间。目前只在肺炎链球菌、大肠杆菌、芽孢杆菌属、嗜血菌属、假单胞杆菌属等的某些菌种和少数真菌中发现。
受体细胞只有处于感受态阶段才能吸收供体的DNA。感受态通常只在生活史中的一个固定时期出现,如肺炎链球菌和枯草芽孢杆菌的感受态都出现在对数期的后期。但是改变某些条件,可提高转化的成功率,如用CaCl2可诱发大肠杆菌产生感受态,在培养基中加入cAMP可将细胞群体的感受态水平提高1万倍。
根据对肺炎链球菌转化作用的研究,受体细菌吸收DNA片段过程可分3步:第一步,释放在培养基中的供体DNA双螺旋片段和处于感受态的受体细胞的特定接受位点结合,此时注入胆碱(细胞膜磷脂的成分)是DNA结合的必需条件;第二步,结合在受体细胞外部的DNA被酶解成许多小段,酶解的部位是随机的;第三步,在提供能量的前提下,DNA片段被吸收进入受体细胞内。DNA片段双链在转化中,只有一条进入受体菌,另一条在进入菌体时或在菌体内很短时间内被DNA分解酶分解成单核苷酸。进入的一条DNA片段与受体DNA在同源区内发生基因交换重组而改变其遗传性状。
起转化作用的供体细胞DNA片段称为转化因子。转化因子的相对分子质量一般在107 左右,约为0.3%的细菌染色体,相当15个基因。如果DNA相对分子质量太小,则不易被感受态细菌所接受。
由于DNA的交换率与其基因间的距离成正比,所以可利用转化作用来测定基因间的相对距离和次序。
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