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7.5%氯化钠肉汤原理及使用方法

李令梅
录入时间:2022-1-24 15:18:01 来源:青岛银河澳门官网入口

一、试验原理:

  用于金黄色葡萄球菌的选择性增菌培养。

  蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源、氮源、维生素和矿物质;较高浓度的氯化钠提供较高的渗透压,抑制大多数非葡萄球菌的微生物。


二、培养基配方(g/L):

蛋白胨

10.0

牛肉浸粉

5.0

氯化钠

75.0

pH 7.4±0.1 25℃


三、试验方法:

 1、培养基制备:称取本品90.0g, 加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶或试管,121℃高压灭菌15分钟,备用。制备好的液态培养基保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,室温保存。

 2、制备质控菌液。

 3、接种

  3.1混合菌的接种

  在装有待测培养基的试管中接种10-100CFU的目标菌,并接种1000-5000CFU的非目标菌,接种总量1ml,同时接种两个平行管,混匀。同时分别将目标菌菌悬液(与试管接种同一稀释度)和非目标菌菌悬液(比试管接种小10-100倍稀释度)1ml倾注平板,接种两个平板,作接种量计数用,36±1℃培养18-24小时。

  3.2非目标菌接种

  在装有待测培养基的试管中接种1000-5000CFU的非目标菌,接种量1ml,同时接种两个平行管,混匀,36±1℃培养18-24小时。

 4、培养液的接种

  4.1混合菌培养液的接种

  用10μL接种环取1环经培养后的混合菌培养液,换线接种到Barid-Parker上,每管接种一个平板,36±1℃培养45-48小时。

  4.2非目标菌培养液的接种

吸取10μL经培养后的非目标菌培养液,均匀涂布接种到TSA上,每管接种一个平板。也可使用倾注法进行接种,36±1℃培养18-24小时。

 5、记录实验结果

  目标菌在选择性平板上的菌落应>10CFU,则表示待测液提培养基的生长率良好;非目标菌在非选择性平板上的菌落<100CFU,则表示待测液体培养基的选择性为良好。


四、结果观察与解释

  接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

方法

质控结果

其他特征

金黄色葡萄球菌

大肠埃希氏菌

ATCC6538

ATCC25922

10-100

1000-5000

半定量

在Barid-Parker上

>10CFU

菌落黑色凸起,周围

浊带,外层透明圈

金黄色葡萄球菌

大肠埃希氏菌

ATCC25923

ATCC25922

10-100

1000-5000

在Barid-Parker上

>10CFU

菌落黑色凸起,周围

浊带,外层透明圈

大肠埃希氏菌

ATCC25922

1000-5000

在TSA上<100CFU

/


图1 7.5%氯化钠肉汤微生物质控结果

备注:a:金黄色葡萄球菌(ATCC25923),b:金黄色葡萄球菌(ATCC6538),c:大肠埃希氏菌,d:空白


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注:本文属银河澳门官网入口原创,未经允许不得转载。

 

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