将宿主菌(如大肠杆菌、福氏志贺氏菌、副溶血弧菌、伤寒沙门氏菌、霍乱弧菌、不凝集弧菌等)于相应的琼脂平皿上划线分离,置37℃培育16~18小时。取单个菌落与相应的血清凝集,血清凝集反应阳性者,转种肉汤振荡(或静止)培养4~6小时,然后再转种克氏瓶斜面,37℃培养18~20小时后。每只克氏瓶加灭菌蒸馏水15~20ml和玻璃珠20粒(直径5mm),反复摇动,洗脱菌苔。并经3000rpm离心40分钟(如此反复2~3次)除去培养基中残余的营养物质。再用细菌浊度计比浊法,或活菌计数法,将浓厚的菌液稀释成400亿/ml，供试验用。