【原理】
本法是从实践中察知苯胺黑或碳素等能吸去菌体上已干燥或未干燥的染料,利用这一性能,使芽孢染成鲜红色、菌体无色,常在淡灰色的背景上见到黑色的细胞壁,使菌体的形态分外清楚。
【成分】
1.萋耳氏石碳酸复红液
若干ml
2.10%苯胺黑(Nigrosin)水液
苯胺黑
10g
蒸馏水
100ml
【制法】
2液:取苯胺黑10g加少量蒸馏水边研磨边滴加完全溶解后,补足蒸馏水至100ml,必要时用滤纸过滤后保存备用。
【用途】
各种细菌芽孢染色。
【染色步骤】
1.加热或自然干燥后在火焰上通过10次以固定标本,然后将萋耳氏石炭酸复红液覆盖抹片,加温染色3分钟,水洗,吸干。
2.用接种环沾取10%苯胺黑水溶液1环(约半粒米大小)置于玻片的涂抹旁,再将另一边缘光滑平整的玻片(推片)放在苯胺黑前方,按照血液涂片制法,使苯胺黑均匀地推过抹片部位,使其成为灰黑色薄层,切勿太厚而成为黑色。待干燥后用油镜观察细菌的芽孢呈鲜红色,轮廓清楚,菌体无色,背景灰蓝或紫色,常可见到细胞壁。
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