【原理】

  某些细菌如变形杆菌属,可产生苯丙氨酸脱氨酶,使苯丙氨酸脱去氨基形成苯丙硐酸,加入三氯化铁试剂后产生绿色反应。

【成分】

  试剂甲: 

L 苯丙氨酸	0.1g
磷酸缓冲液pH7.2-7.4	10ml

  试剂乙:

三氯化铁	0.8g
蒸馏水	10ml

【制法】

  (1)分别用磷酸缓冲液溶解L 苯丙氨酸和蒸馏水溶解三氯化铁配制成10%L-苯丙氨酸溶液和8%三氯化铁溶液;

  (2)将10X10(mm)大小的滤纸片浸入甲液(10%L-苯丙氨酸溶液)中,取出后置室温内待干或将纸片保存在密闭瓶中,保持一定的温度,也可在临用前浸湿;

  (3)用较少脱脂棉制成小棉棒,置一干燥玻皿。内保存备用,也可在临用前浸沾试剂。

【用途】

  主要用于肠杆菌科之鉴定。变形杆菌属和普罗菲登斯菌均为阳性,肠杆菌科及其它细菌则为阴性。测定苯丙氨酸脱氨酶时,将细菌沾抹在浸有试剂的纸片上,放在平皿中置37℃或50℃作用5-15分钟后,加8%三氯化铁溶液一滴于纸片菌落上,立即呈现绿色为阳性,黄色为阴性。

【注意事项】

  1.测定变形杆菌脱氨酶时,如有其它细菌混合生长时可以不必分纯,混合抹取菌落,按上法进行试验,对变形杆菌的鉴定亦无影响。

  2.此试剂可少量配制,保存于室温或冰箱内均可,在使用过程中如发生混浊现象亦可使用。

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