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    乳酸杆菌选择性培养基原理及实验现象

    纪英姿
    录入时间:2021-10-25 14:35:44 来源:青岛银河澳门官网入口

    一、用途:

      用于乳酸菌的分离培养。


    二、实验原理:

      胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖提供碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;枸橼酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、硫酸亚铁、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,吐温80为乳酸杆菌提供所需的代谢脂肪酸;柠檬酸铵和乙酸钠能够抑制一些杂菌的生长,包括链球菌、霉菌和除乳酸杆菌外的大多数口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑制了其它细菌的生长,有利于乳酸杆菌的分离;加入碳酸钙是由于乳酸菌在培养基中产酸可以形成溶钙环,便于区分;琼脂是培养基的凝固剂。


    三、培养基配方(g/L):

    酵母浸粉

    2.0

    胰酪蛋白胨

    10.0

    磷酸二氢钾

    2.0

    牛肉浸粉

    10.0

    硫酸镁

    0.2

    葡萄糖

    20.0

    乙酸钠

    5.0

    枸橼酸三铵

    2.0

    硫酸锰

    0.05

    碳酸钙

    5.0

    吐温80

    1.0

    琼脂

    25.0

    pH 6.0-6.5  25℃

    此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果

    四、试验方法:

      1、称取本品82.25g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶 200ml,115℃高压灭菌 15-20min,冷至 50℃左右时,倾入无菌平皿,备用。

      2、制备质控菌液。

      3、用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划三区,同时接种两个平板。

      4、36±1°C下培养24-48小时,记录实验结果。


    五、结果观察与解释:

      接种以下质控菌株,在36±1℃下培养24-48小时:

    质控菌株

    菌株编号

    接种量(CFU)

    方法

    质控评定标准

    其他特征

    嗜酸乳杆菌

    CICC6005

    /

    定性

    +++

    白色突起菌落,有溶钙环

    植物乳杆菌

    ATCC8014

    /

    定性

    +++

    白色突起菌落,有溶钙环


    图1 植物乳杆菌微生物质控结果


    六、注意事项:

      本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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    注:本文属银河澳门官网入口原创,未经允许不得转载。

     

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