







一、用途:
用于乳酸菌的分离培养。
	
二、实验原理:
胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖提供碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;枸橼酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、硫酸亚铁、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,吐温80为乳酸杆菌提供所需的代谢脂肪酸;柠檬酸铵和乙酸钠能够抑制一些杂菌的生长,包括链球菌、霉菌和除乳酸杆菌外的大多数口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑制了其它细菌的生长,有利于乳酸杆菌的分离;加入碳酸钙是由于乳酸菌在培养基中产酸可以形成溶钙环,便于区分;琼脂是培养基的凝固剂。
	
三、培养基配方(g/L):
| 
					 酵母浸粉  | 
				
					 2.0  | 
			
| 
					 胰酪蛋白胨  | 
				
					 10.0  | 
			
| 
					 磷酸二氢钾  | 
				
					 2.0  | 
			
| 
					 牛肉浸粉  | 
				
					 10.0  | 
			
| 
					 硫酸镁  | 
				
					 0.2  | 
			
| 
					 葡萄糖  | 
				
					 20.0  | 
			
| 
					 乙酸钠  | 
				
					 5.0  | 
			
| 
					 枸橼酸三铵  | 
				
					 2.0  | 
			
| 
					 硫酸锰  | 
				
					 0.05  | 
			
| 
					 碳酸钙  | 
				
					 5.0  | 
			
| 
					 吐温80  | 
				
					 1.0  | 
			
| 
					 琼脂  | 
				
					 25.0  | 
			
| 
					 pH 6.0-6.5 25℃  | 
			|
此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果
四、试验方法:
1、称取本品82.25g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶 200ml,115℃高压灭菌 15-20min,冷至 50℃左右时,倾入无菌平皿,备用。
2、制备质控菌液。
3、用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划三区,同时接种两个平板。
4、36±1°C下培养24-48小时,记录实验结果。
	
 
五、结果观察与解释:
接种以下质控菌株,在36±1℃下培养24-48小时:
| 
					 质控菌株  | 
				
					 菌株编号  | 
				
					 接种量(CFU)  | 
				
					 方法  | 
				
					 质控评定标准  | 
				
					 其他特征  | 
			
| 
					 嗜酸乳杆菌  | 
				
					 CICC6005  | 
				
					 /  | 
				
					 定性  | 
				
					 +++  | 
				
					 白色突起菌落,有溶钙环  | 
			
| 
					 植物乳杆菌  | 
				
					 ATCC8014  | 
				
					 /  | 
				
					 定性  | 
				
					 +++  | 
				
					 白色突起菌落,有溶钙环  | 
			
	
	
 
图1 植物乳杆菌微生物质控结果
	
 
六、注意事项:
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
	
 
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