一、试验原理:
用于分离培养病原性金黄色葡萄球菌。
蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;D—甘露醇为可发酵糖类;7.5%浓度氯化钠可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生长;琼脂是培养基的凝固剂;酚红为pH指示剂,金黄色葡萄球菌可分解培养基中的甘露醇产酸,使菌落周围变黄,并能降解卵黄中的卵磷脂使菌落产生晕圈。
二、培养基配方(g/L):
蛋白胨 |
10.0 |
D-甘露醇 |
10.0 |
牛肉粉 |
2.5 |
氯化钠 |
75.0 |
酚红 |
0.025 |
琼脂 |
15.0 |
pH 7.4±0.2 25℃ |
三、试验方法:
粉体装培养基的使用:
1. 称取本品112.5g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸1分钟,121℃高压灭菌15分钟,待培养基冷却至45-50℃时,无菌操作,加入50%卵黄乳液30ml,摇匀,倾入无菌平皿,备用。
2. 制备质控菌液。
3. 选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。
4. 36±1℃需氧培养24-48小时,记录实验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,36±1℃需氧培养24-48小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
/ |
G≤1 |
/ |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
黄色菌落,菌落周围有晕圈 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
20-200 |
PR≥0.7 |
黄色菌落,菌落周围有晕圈 |
||
表皮葡萄球菌 |
CMCC(B)26069 |
20-200 |
PR≥0.7 |
红色菌落,没有晕圈 |
|
|
五、注意事项:
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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