一、试验用途及原理：

  此试验常用于绿脓杆菌和双歧杆菌的生化鉴定。

  蛋白胨和酵母粉提供基本营养需求；磷酸氢二钾调节培养基的pH；葡萄糖酸钾可被某些细菌分解成还原性的葡萄糖，然后与班氏试剂发生反应生成砖红色沉淀。

二、培养基配方（g/L)

  班氏试剂配方（g/L)

  1.挑取待测菌的单菌落至无菌生理盐水中，制备约10⁹CFU/mL浓度菌悬液。

  2.吸取100微升菌悬液加入到葡萄糖酸盐生化管中，并放置于36±1℃，需氧条件下培养24±2小时（若培养双歧杆菌，需厌氧培养）。

  3.培养结束后按1:1的比例加入班氏试剂，并将生化管置于沸水浴中水浴1-10分钟，冷却后观察结果。如出现砖红色沉淀，则为阳性；若颜色依为浅蓝色，则为阴性。

三、实验结果：

质控菌株	菌株编号	接种量 （CFU)	参比或计 数培养基	方法	生长 情况	其他特征
大肠埃希氏菌	ATCC25922	＞5000	/	定性	+++	(+)砖红色(滴加班氏试剂)
铜绿假单胞菌	ATCC27853	＞5000	/	定性	+++	(+)砖红色(滴加班氏试剂)
铜绿假单胞菌	ATCC9027	＞5000	/	定性	+++	(-)浅蓝色(滴加班氏试剂)

a：大肠埃希氏菌ATCC25922；b：铜绿假单胞菌ATCC27853；c：铜绿假单胞菌ATCC9027；d：空白对照

图1 葡萄糖酸盐试验

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