用于细菌尿素酶反应。
产尿素酶的细菌分解尿素后产氨,pH上升培养基呈碱性,酚红为酸碱指示剂,变色范围为pH6.8-8.4,颜色由黄色变为红色。因此培养基颜色由橙色变为玫红色为尿素酶试验阳性。大多数尿素酶阴性细菌会分解培养基中少量的葡萄糖产酸,使培养基变黄,也有少数尿素酶阴性的细菌不分解葡萄糖,无颜色变化。培养基出现变黄或不变色均为尿素酶阴性反应。
三、培养基配方(g/L):
蛋白胨 |
1.0 |
葡萄糖 |
1.0 |
氯化钠 |
5.0 |
磷酸氢二钾 |
2.0 |
20%无菌脲溶液 |
100mL |
酚红 |
0.012 |
pH 6.9±0.1 25℃ |
四、试验方法:
1、用磨砂轮在安瓿瓶颈部划线一圈,掰开待用。
2、将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法,制备成5 McFarland浊度(约109CFU/ml)的菌悬液。3、吸取0.05ml-0.08ml(约1-2滴)菌悬液至生化管中,36±1℃培养24-120h后,观察实验结果。
接种以下质控菌株,36±1℃培养24-120h:
质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
其他特征 |
单增李斯特氏菌 |
ATCC19114 |
+++ |
阴性,黄色 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
+++ |
阴性,黄色 |
普通变形杆菌 |
ATCC13315 |
+++ |
阳性,玫红色 |
奇异变形杆菌 |
ATCC14153 |
+++ |
阳性,玫红色 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
+++ |
阴性,黄色 |
备注:a:单增李斯特氏菌,b:大肠埃希氏菌,c:普通变形杆菌,d:奇异变形杆菌,e:鼠伤寒沙门氏菌,f:空白对照
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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