一、试验原理
本培养基用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。
明胶蛋白胨、酵母浸粉为微生物的生长提供氮源、碳源及维生素;甘露醇为可发酵糖类;酚红为酸碱指示剂;磷酸氢二钾为pH缓冲剂;甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用;较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长,金黄色葡萄球菌可还原亚碲酸钾,使菌落显黑色,同时可分解培养基中的甘露醇产酸,使培养基变黄;琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L)
明胶蛋白胨 |
10.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
甘露醇 |
10.0 |
酚红 |
0.025 |
磷酸氢二钾 |
5.0 |
氯化锂 |
5.0 |
甘氨酸 |
10.0 |
琼脂 |
16.0 |
pH7.2±0.2 | 25℃ |
三、试验方法
1、称取本品61.0g,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中,煮沸1分钟,121℃高压灭菌15min,冷至45-50℃左右时,加入20mL过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液,混匀,倾入无菌平皿。
2、制备质控菌液,接种到培养基上。
3、放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量 |
回收率 |
生长情况 |
其它特征 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落,菌落周围黄色 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落,菌落周围黄色 |
表皮葡萄球菌 |
CMCC(B)26069 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落,菌落周围不变色 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
﹣ |
抑制 |
V-J琼脂培养基微生物质控结果:
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金黄色葡萄球菌ATCC 25923 黑色菌落,菌落周围黄色 |
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金黄色葡萄球菌ATCC 6538 黑色菌落,菌落周围黄色 |
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表皮葡萄球菌CMCC(B)26069 黑色菌落,菌落周围不变色 |
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大肠埃希氏菌ATCC 25922 抑制 |
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