一、用途及原理
用于脆弱拟杆菌的选择性分离培养。
胰蛋白胨、大豆胨提供细菌生长的基本营养,氯化钠维持渗透压,较高含量的牛胆粉可抑制革兰氏阳性菌的生长,并能与氯化血红素一同促进脆弱拟杆菌的生长,庆大霉素为光谱抗生素,对多数肠杆菌、假单胞菌、葡萄球菌、链球菌、芽孢杆菌等有较强的抗菌活性,可抑制多数杂菌的生长,可促进脆弱拟杆菌的生长,琼脂为凝固剂,七叶苷和柠檬酸铁铵为指示剂,脆弱拟杆菌可分解七叶苷生成七叶素,与柠檬酸铁铵反应变黑,使菌落呈现棕黑色。
二、培养基配方(g/L)
胰蛋白胨 |
15.0 |
大豆胨 |
5.0 |
氯化钠 |
5.0 |
牛胆粉 |
20.0 |
七叶苷 |
1.0 |
柠檬酸铁按 |
0.5 |
氯化血红素 |
0.0125 |
庆大霉素 |
0.1 |
琼脂 |
15.0 |
pH7.0±0.2 | 25℃ |
三、使用方法及注意事项
1.称取本品61.6g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时倾入无菌平皿,备用。
2.用接种环挑取菌液划线接种至BBE平板(或涂布接种),将接种后的平板置于厌氧环境36±1℃培养24-48h。
注意事项:①培养基中含有的氯化血红素在灭菌后易产生沉淀,倒平板之前需充分进行摇匀。②脆弱拟杆菌为厌氧菌,接触氧气容易死亡,建议应在厌氧工作台中操作;如在正常空气中操作,必须快速完整接种工作并立即转移至厌氧环境中,防止脆弱拟杆菌过量死亡。
四、试验现象与解释
接种以下质控菌株,在36±1℃厌氧培养24-48小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
其他特征 |
脆弱拟杆菌 |
ATCC25282 |
+++ |
棕黑色菌落 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
- |
抑制 |
脆弱拟杆菌在BBE平板上的生长特征:
棕黑色菌落
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