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类杆菌-胆汁-七叶苷琼脂(BBE)原理及现象

纪旭艳
录入时间:2021-6-29 14:20:52 来源:青岛银河澳门官网入口

一、用途及原理


  用于脆弱拟杆菌的选择性分离培养。


  胰蛋白胨、大豆胨提供细菌生长的基本营养,氯化钠维持渗透压,较高含量的牛胆粉可抑制革兰氏阳性菌的生长,并能与氯化血红素一同促进脆弱拟杆菌的生长,庆大霉素为光谱抗生素,对多数肠杆菌、假单胞菌、葡萄球菌、链球菌、芽孢杆菌等有较强的抗菌活性,可抑制多数杂菌的生长,可促进脆弱拟杆菌的生长,琼脂为凝固剂,七叶苷和柠檬酸铁铵为指示剂,脆弱拟杆菌可分解七叶苷生成七叶素,与柠檬酸铁铵反应变黑,使菌落呈现棕黑色。


二、培养基配方(g/L)


胰蛋白胨

15.0

大豆胨

5.0

氯化钠

5.0

牛胆粉

20.0

七叶苷

1.0

柠檬酸铁按

0.5

氯化血红素

0.0125

庆大霉素

0.1

琼脂

15.0

pH7.0±0.2 25℃


三、使用方法及注意事项


  1.称取本品61.6g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时倾入无菌平皿,备用。


  2.用接种环挑取菌液划线接种至BBE平板(或涂布接种),将接种后的平板置于厌氧环境36±1℃培养24-48h。


  注意事项:①培养基中含有的氯化血红素在灭菌后易产生沉淀,倒平板之前需充分进行摇匀。②脆弱拟杆菌为厌氧菌,接触氧气容易死亡,建议应在厌氧工作台中操作;如在正常空气中操作,必须快速完整接种工作并立即转移至厌氧环境中,防止脆弱拟杆菌过量死亡。


四、试验现象与解释


  接种以下质控菌株,在36±1℃厌氧培养24-48小时:

质控菌株

菌株编号

生长情况

其他特征

脆弱拟杆菌

ATCC25282

+++

棕黑色菌落

金黄色葡萄球菌

ATCC25923

-

抑制


  脆弱拟杆菌在BBE平板上的生长特征:

棕黑色菌落


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