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微生物技术资料
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D/E中和琼脂的使用

徐永利
录入时间:2021-6-3 10:45:48 来源:青岛银河澳门官网入口

一、试验用途和原理


  该培养基主要用于用于卫生环境表面微生物计数和分离培养。


 胰蛋白胨和酵母粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;硫代硫酸钠、硫乙醇酸钠、亚硫酸氢钠、卵磷脂和吐温80为中和剂,可中和醛类消毒剂、含氯消毒剂、含碘消毒剂、季铵盐类消毒剂、过氧化物消毒剂等多种消毒剂的消毒作用;溴甲酚紫是酸碱指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。


二、培养基配方(g/L)


胰蛋白胨

5.0

酵母粉

2.5

葡萄糖

10.0

硫代乙醇酸钠

1.0

硫代硫酸钠

6.0

亚硫酸氢钠

2.5

溴甲酚紫

0.02

卵磷脂

7.0

琼脂

15.0

pH值7.6±0.2 25℃

三、试验方法


 1.称取本品49g,另取吐温-80 5g加入,混匀,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水,分装,121℃高压灭菌15分钟后,将灭菌完毕的培养基倾入无菌平皿中,备用。


 2.将质控菌株稀释至合适梯度,使最终细菌含量为100-1000CFU/mL。


 3.用移液枪吸取质控菌株100μL加入备用的平皿中,涂布使菌液在培养基表面均匀涂开。


 4.将接好菌种的培养基放置于36±1℃需氧环境中倒置培养40-48小时。


四、实验结果


质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

回收率

生长情况

其他特征

大肠埃希氏菌

ATCC25922

10-100

TSA

≥70%

+++

黄色菌落

金黄色葡萄球菌

ATCC25923

10-100

TSA

≥70%

+++

黄色菌落

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC14028

10-100

TSA

≥70%

+++

黄色菌落

铜绿假单胞菌

ATCC27853

10-100

TSA

≥70%

+++

紫色菌落

枯草芽孢杆菌

ATCC6633

10-100

TSA

≥70%

+++

紫色菌落


 D/E中和琼脂实验结果:






大肠埃希氏菌

黄色菌落




金黄色葡萄球菌

黄色菌落











鼠伤寒沙门氏菌

黄色菌落




铜绿假单胞菌

紫色菌落







枯草芽孢杆菌

紫色菌落


五、注意事项


 本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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 注:本文属银河澳门官网入口原创,未经允许不得转载。

 

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