一、用途
用于细菌的精氨酸双水解酶试验。
二、实验原理
细菌前期利用培养基中的糖类发酵产酸,使培养基变黄;酸性条件下可刺激细菌产生氨基酸脱羧酶,精氨酸水解后生成鸟氨酸、氨及CO2,鸟氨酸又在脱羧酶的作用下生成腐胺,腐胺和氨均为碱性物质,可使培养基变碱,颜色由黄变紫色,若细菌不能分解精氨酸产碱,培养基仍然呈黄色。
三、培养基配方(g/L)
酵母浸粉 |
3.0 |
L-精氨酸 |
5.0 |
葡萄糖 |
1.0 |
溴甲酚紫 |
0.016 |
氯化钠 |
30 |
pH6.8±0.1 | 25℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果
四、试验方法
1、制备质控菌液,将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法,制备成5 McFarland浊度(约109CFU/ml)的菌悬液。
2、用磨砂轮在安瓿瓶颈部划线一圈,掰开待用。
3、吸取0.05ml-0.08ml(约1-2滴)菌悬液至生化管中,覆盖300μL液体无菌石蜡,36±1℃培养24±3h后,观察试验结果。
五、结果观察与解释
接种以下质控菌株,在36±1℃需氧培养24±3h:
质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
其他特征 |
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
+++ |
阴性,黄色 |
霍乱弧菌 |
/ |
+++ |
阴性,黄色 |
溶藻弧菌 |
ATCC17749 |
+++ |
阴性,黄色 |
创伤弧菌 |
ATCC27562 |
+++ |
阴性,黄色 |
阴沟肠杆菌 |
ATCC23355 |
+++ |
阳性,紫色 |
精氨酸双水解酶肉汤生化管质控结果:
六、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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