一、试验原理
MC培养基是一种用于食品中嗜热链球菌总数测定的培养基。
其所含大豆蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源;碳酸钙可与微生物发酵代谢过程中产生的酸起反应,形成中性化合物和二氧化碳,防止培养基变酸,并初步辨别产酸菌;琼脂是培养基的凝固剂;中性红为pH 指示剂。
二、培养基配方(g/L)
成分 |
含量(g/L) |
大豆蛋白胨 |
5.0 |
牛肉浸粉 |
3.0 |
酵母浸粉 |
3.0 |
葡萄糖 |
20.0 |
乳糖 |
20.0 |
碳酸钙 |
10.0 |
琼脂 |
15.0 |
中性红 |
0.05 |
pH值6.0±0.1 25℃ |
三、试验方法
1.称取本品80.0g,加热煮沸溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,并倒平板备用;
2.将质控菌株稀释至合适梯度,用移液枪吸取100微升涂布于MC平板,并用MC平板做参比培养基;
3.将涂布好的平板放置于36±1℃需氧环境中培养48±2小时。
四、实验结果与解释
接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养48±2小时。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控结果 |
其他特征 |
嗜热链球菌 |
IFFI6038 |
20-200 |
MC培养基 |
定量 |
PR≥0.7 |
边缘光滑红色中等偏小菌落,背面粉红色 |
嗜酸乳杆菌 |
CICC6005 |
20-200 |
MC培养基 |
定量 |
PR≥0.7 |
淡粉色菌落,有明显溶钙环 |
嗜酸乳杆菌在生长发酵过程中可产生大量乳酸,故可与碳酸钙发生反应生成明显溶钙环;而嗜热链球菌在发酵过程中也可产生L-乳酸和叶酸,与碳酸钙发生反应生成较微弱溶钙环。结果如图一。
图一
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