







一、实验原理:
	
 
本培养基用于霍乱弧菌的生化试验(SN标准)
牛肉粉、酵母粉、月示蛋白胨、蛋白胨提供氮源、维生素和矿物质,乳糖、葡萄糖是可发酵的糖,氯化钠维持均衡的渗透压,琼脂是培养基的凝固剂。
	
 
二、培养基配方(g/L):
	
 
| 
					 成分  | 
				
					 用量  | 
			|
| 
					 牛肉粉  | 
				
					 3.0  | 
			|
| 
					 酵母粉  | 
				
					 3.0  | 
			|
| 
					 月示蛋白胨  | 
				
					 15.0  | 
			|
| 
					 蛋白胨  | 
				
					 5.0  | 
			|
| 
					 乳糖  | 
				
					 5.0  | 
			|
| 
					 葡萄糖  | 
				
					 1.0  | 
			|
| 
					 硫酸亚铁  | 
				
					 0.2  | 
			|
| 
					 氯化钠  | 
				
					 20.0  | 
			|
| 
					 硫代硫酸钠  | 
				
					 0.3  | 
			|
| 
					 琼脂  | 
				
					 12.0  | 
			|
| 
					 酚红  | 
				
					 0.024  | 
			|
| 
					pH7.2-7.6 | 
				
					25℃ | 
			|
	
  
三、实验方法:
	
	
 
称取本品 64.5g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,分装于试管内的 3/4 左右高度,121℃高压灭菌 15 分钟,放置高层斜面备用。
	
 
四、结果观察与解释
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。
| 
				 质控菌株  | 
			
				 菌株编号  | 
			
				 接种量(CFU)  | 
			
				 生长情况  | 
			
				 其它特征  | 
		
| 
				 霍乱弧菌非01群  | 
			
				 HB081127A-1  | 
			
				 /  | 
			
				 +++  | 
			
				 K/A,H2S(-),产气(-)  | 
		
| 
				 副溶血性弧菌  | 
			
				 ATCC17802  | 
			
				 /  | 
			
				 +++  | 
			
				 K/A,H2S(-),产气(-)  | 
		
| 
				 溶藻弧菌  | 
			
				 ATCC17749  | 
			
				 /  | 
			
				 +++  | 
			
				 K/A,H2S(-),产气(-)  | 
		
| 
				 大肠埃希氏菌  | 
			
				 ATCC25922  | 
			
				 /  | 
			
				 +++  | 
			
				 A/A,H2S(-),产气(+)  | 
		
| 
				 鼠伤寒沙门氏菌  | 
			
				 ATCC14028  | 
			
				 /  | 
			
				 +++  | 
			
				 K/A,H2S(+),产气(+)  | 
		
| 
				 普通变形杆菌  | 
			
				 ATCC13315  | 
			
				 /  | 
			
				 +++  | 
			
				 K/A,H2S(+),产气(+)  | 
		
	
	
 
实验结果现象与说明:
1.霍乱弧菌非01群、副溶血性弧菌、溶藻弧菌
斜面红/底层黄:发酵葡萄糖但不发酵乳糖,是不发酵乳糖的特征的菌类。
2.大肠埃希氏菌
斜面黄/底层黄:既发酵乳糖也发酵葡萄糖,产生大量的酸使整个培养基呈黄色,同时有产气现象。
3.鼠伤寒沙门氏菌、普通变形杆菌
斜面红/底层黄(部分区域黑色):发酵葡萄糖但不发酵乳糖同时产生硫化氢,是产硫化氢不发酵乳糖特征。
硫化氢的产生:这类菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氢,硫化氢和培养基中的铁盐反应生成黑色的硫化亚铁沉淀。
	
 
五、注意事项
	
 
能产生硫化氢的菌应及时观察试验结果,以免生成的硫化铁形成黑色区域,遮盖斜面与底层的颜色影响判断结果。
	
 
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