一、用途:
用于霉菌和酵母菌分离培养和计数(Merck标准)。
二、原理:
酵母粉提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;土霉素可抑制细菌的生长;琼脂是培养基凝固剂。
三、培养基配方(g/L):
葡萄糖 |
10.0 |
酵母粉 |
5.0 |
琼脂 |
15.0 |
pH 7.1±0.2 |
25℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果
四、实验方法:
1、称取本品15.0g,加热搅拌溶解于500ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50-55℃左右时,无菌操作加入过滤除菌土霉素50mg,混匀,倾入无菌平皿。
2、制备质控菌液。
3、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。
4、用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。
5、22±3℃倒置培养基培养48-72h,记录实验结果。
五、结果观察及解释:
接种以下质控菌株,22±3℃倒置培养基培养48-72h:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
100-1000 |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
酵母菌 |
ATCC18790 |
10-100 |
沙氏葡萄糖琼脂 |
定性 |
/ |
白色突起菌落 |
黑曲霉 |
ATCC16404 |
10-100 |
PR≥0.7 |
有黑色孢子 |
||
白色念珠菌 |
ATCC10231 |
10-100 |
PR≥0.7 |
白色突起菌落 |
六、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充实验。
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