银河澳门官网入口,银河集团网址登录



银河澳门官网入口,银河集团网址登录

中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服热线:400-0532-596
微生物技术资料
文章检索
  首页 > 微生物知识->微生物书籍->细菌的芽孢染色法

细菌的芽孢染色法



录入时间:2008-10-28 11:03:55 来源:青岛海博

 目的要求
1 .学习并掌握芽孢染色法.2 .初步了解芽孢杆菌的形态特征,
二、基本原理
芽孢又叫内生孢子,是某些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体,通常呈国形或肺圈形.细曲能否形成芽孢叙及芽孢的形状芽孢在芽孢囊内的位t 、芽鹅班是否膨大等特征是鉴定细菌的依据之一
由于芽孢壁厚、透性低上不易着色.当用石炭酸复红.结晶紫等进行单染色时,菌体和芽孢囊着色,而芽孢囊内的芽孢不着色或仅显很淡的颇色,游离的芽孢呈淡红或淡蓝紫色的圈或捕圈形的圈,为了使芽孢粉色便于观察.可用芽孢染色法。
芽孢染色法的基本原理是:用着色力强的染色荆孔雀绿或石炭酸复红,在加热条件下染色,使染料不仅进人蔺体也可进人芽孢内,进人菌体的染料经水洗后被脱色,而芽袍一经普色难以被水洗脱,当用对比度大的友染荆染色后,芽孢仍保留初染剂的颇色,而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色,使芽袍和菌体更易于区分
三、器材
1 .菌种 蜡样芽孢杆菌约2d 百养琼脂斜面培养物,球形芽袍杆菌1~2d 营养琼脂斜面培养物.
2 .染色荆5 肠孔雀绿水溶液,0 . 5 %番红水溶液。
3 .仪器或其他用具小试管.滴管,烧杯,试管架,载玻片,木夹子,显微镜等.
四、操作步骤
(一)改良的Schaeffer-Fulton氏染色法
1 .制备菌悬液
加1~2 滴水于小试管中,用接种环挑取2 ~3 环菌苔于试管中,搅拌均匀,制成浓的菌悬液. 
2 染色
加孔雀绿染液2~3 滴于小试管中,并使其与菌液混合均匀,然后将试管置于沸水浴的烧杯中,加热染色15~20 mm 。
3 涂片固定
用接种环挑取试管底部菌液数环于洁净载玻片上,涂成薄膜,然后将涂片通过火焰3 次温热固定。
4 脱色
水洗.直至流出的水无绿色为止.
5 .复染
用番红染液染色2~3min ,倾去染液并用滤纸吸干残液.
6 .镜检
干澡后用油镜观察.
芽孢呈绿色,芽孢囊及营养体为红色.
(二〕 Schaeffer-Fulton氏染色法
1 .制片
按常规涂片、下燥、固定,
2 .染色
加数滴孔雀绿染液于涂片上,用木夹夹住载玻片一端,在微火上加热至染料冒燕气并开始汁时.维持5min . 
加热过程中及时补充染液.切勿让涂片干涸.
3 .水洗
待玻片冷却后,用缓流自来水冲洗,直至流出的水无色为止。
4 .复染
用番红染液复染2min . 
5  水洗
用缓流水洗后,吸干,
6 .镜检
干后油镜观察。
芽孢呈绿色,芽孢囊及营养体为红色.
五、实验报告
1 .结果
绘图表示两种芽孢杆茵的形态特征(注意芽孢的形状、着生位置及芽孢囊的形状特征). 2 .思考题
( l )说明芽孢染色法的原理.用简单染色法能否观察到细苗的芽孢?
( 2 )用Schaefrer 一Fulton 氏染色法加热染色时,若因一时疏忽玻片上的染液被烘千,此时能否立即补加染液?为什么?
( 3 )若涂片中观寮到的只是大且游离芽孢,很少看到芽孢袭及营养细胞,你认为这是什么原因?
  
   

 

上一篇:革兰氏染色法

下一篇:荚膜染色法

首页 | 关于我们 | 网上商城 | 在线客服 | shchuhu.com
业务联系电话
   400-0532-596 0532-66087773
   0532-66087762 0532-81935169
邮箱:qdhbywg@vip.126.com
地址:青岛市城阳区锦汇路1号A2栋
产品技术咨询
  工作日(周一至周六8:00-18:00):
  18562658263 13176865511
  其它时段:13105190021
投诉与建议:13105190021 13006536294