一、培养基用途:
用于梭菌的增菌培养和计数。
二、培养基成分及使用方法:
1.培养基成分
成分 |
含量(g/L) |
蛋白胨 |
10.0 |
牛肉浸粉 |
10.0 |
酵母粉 |
3.0 |
葡萄糖 |
5.0 |
可溶性淀粉 |
1.0 |
氯化钠 |
5.0 |
醋酸钠 |
3.0 |
L-半胱氨酸盐酸盐 |
0.5 |
琼脂 |
0.5 |
pH 6.8±0.1 25℃ |
2.使用方法
称取本品38.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装于试管中,每支10mL,每支试管上方用液体石蜡覆盖。121℃高压灭菌15分钟。
三、原理:
蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、可溶性淀粉和L-半胱氨酸盐酸盐提供碳源、氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;醋酸钠可抑制革兰氏阴性菌;微量琼脂(0.5g)增加了其还原环境的稳定性,可以防止液体对流,即防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散,有利于厌氧环境的形成;无动力的细菌在此培养基中呈颗粒状或条状生长,可进行计数;有动力的细菌在培养基中通常呈浑浊生长,一般不能计数。
四、实验结果:
1、按使用方法制备培养基,接种以下质控菌株,在30-35℃厌氧培养48小时。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况(回收率) |
其他特征 |
产气荚膜梭菌 |
CMCC(B)64941 |
10-100 |
良好 |
浑浊 |
生孢梭菌 |
ATCC13124 |
10-100 |
良好 |
浑浊 |
2、产气荚膜梭菌和生孢梭菌在培养基中的生长情况如下图所示:
强化梭菌培养基(RCM)微生物质控结果
a:产气荚膜梭菌,b:生孢梭菌
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