一、试验原理:
哥伦比亚MUG培养基用于大肠杆菌的荧光检测(SN标准)。
特殊蛋白胨和可溶性淀粉作为培养基中的基础营养物质,提供细菌生长所需的碳氮源、维生素和其他的生长因子;氯化钠维持培养基的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;大肠埃希氏菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide,MUG)的β-糖醛酸苷键,使其水解,释放的4-甲基伞形酮在366 nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。
二、培养基配方(g/L):
特殊蛋白胨 |
23.0 |
氯化钠 | 5.0 |
可溶性淀粉 |
1.0 |
琼脂 | 15.0 |
pH值7.3±0.2(25℃) |
三、试验方法:
1.称取本品4.4g和0.01g MUG,加热溶解于100mL蒸馏水中,121℃高压灭菌15min,冷至55-60℃左右时,倾入无菌平皿,备用;
2.使用前,把制备好的平板放置室温10-20min;
3.制备质控菌液;
4.取100μL质控菌液涂布接种于待测培养基和TSA上;
5.放置36±1℃需氧培养24±2小时,记录试验结果。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24±2小时。
注:回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
20-200 |
+++ |
在366nm紫外灯下有荧光 |
大肠埃希氏菌 |
CMCC 44568 |
20-200 |
+++ |
在366nm紫外灯下有荧光 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
20-200 |
+++ |
在366nm紫外灯下无荧光 |
哥伦比亚MUG培养基质控结果:366nm紫外灯照射下
A:大肠埃希氏菌ATCC 25922;B:大肠埃希氏菌CMCC 44568;
C:鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028;
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