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脲酶的测定方法介绍



录入时间:2020-5-11 13:37:43 来源:青岛银河澳门官网入口

1.方法一

 

   (1)培养基

蛋白胨

1g

NaCl

5g

葡萄糖

1g

KH2PO4

2g

酚红(0.2%酚红水溶液)

6ml

琼脂

20g

蒸馏水

1000ml

   灭菌后调pH至6.8-6.9使培养基呈橘黄色或微带粉红色为宜,分装试管,分装散以适于摆斜面为度,l15℃蒸气灭菌30min。20%的尿素溶液过滤灭菌后,待基础培养基冷却到50-55℃时,将灭菌的尿素溶液加到培养基中,终浓度为2%,然后摆成较大的斜面。

 

   (2)结果观察

   接种后适温培养,分别于2h、4h过夜观察。阴性结果要观察4天,培养基呈桃红色者为阳性,培养基颜色不变者为阴性。

 

   (3)注意事项

   ①该实验应有不加尿素的空白对照(尤其是测定假单胞菌时);②应该有已知的阳性菌对照。

 

2.方法二

 

   将测定菌接在营养琼脂斜面上,在第3天和第7天进行脲酶的测定。方法是:在空试管中,将斜面菌苔做成2ml浓菌悬液,加入一滴酚红指示剂,调pH到7,即酚红刚刚转黄呈橙红色,再将此菌悬液分作两份,在其中的一管加入少许结晶的尿素约0.05-0.1g,另一管不加尿素作为对照。如加尿素的试管的几分钟变碱,酚红指示剂变红,则表示测定菌为脲酶阳性。不变者,则为阴性。

   本文节选自《常见细菌系统鉴定手册》第十四章。

 

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