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葡萄糖的氧化发酵



录入时间:2020-5-8 15:01:28 来源:青岛银河澳门官网入口

1.培养基

 

   (1)休和利夫森二氏培养基

 

蛋白胨

2g

NaCl

5g

K2HPO4

0.2g

葡萄糖

10.0g

琼脂

6.0g

溴百里酚蓝(溴麝香酚蓝),1%水溶液3ml

(先用少量95%乙醇溶解后,再加水配成1%的水溶液)

蒸馏水1000ml

     pH 7.0-7.2,分装试管,培养基高度约4.5cm, 115℃蒸气灭菌20min。

 

   (2)博德和霍尔二氏培养基

 

NH4H2PO4

0.5g

酵母膏

0.5g

K2HPO4

0.2g

葡萄糖

10.0g

琼脂

6.0g

溴百里酚蓝(溴麝香酚蓝),1%水溶液3ml

(先用少量95%乙醇溶解后,再加水配成1%的水溶肥也)

蒸馏水

1000ml

     pH 7.0-7.2,分装,灭菌同上。

 

2.接种

 

  (1)以18-24h幼龄菌种作种子,穿刺接种,每株4支。

  (2)其中2支用灭菌的凡士林石蜡油(熔化的2/3凡士林中加入1/3液体石蜡,高压灭菌)封盖,约0.5-lcm厚,以隔绝空气为闭管。另2支不封油为开管,同时还要有不接种的闭管和开管作对照。

  (3)适温培养1,2,3,7,14天观察结果。

 

3. 结果检查

 

  (1)只有开管产酸变黄者为氧化型;开管和闭管均产酸变黄者为发酵型。

  (2)本实验可同时观察细菌的运动性,观察运动性时琼脂软硬必须合适,我们所用的琼脂(海燕牌琼脂条)以0.5%-0.6%为宜,其他牌号的琼脂则须经实验决定使用浓度。琼脂的浓度以放倒试管不流动,轻轻敲打则琼脂柱破碎为宜。

  (3)如培养基制好后,在温度较低的地方存放,在使用前应在沸水中融化,并用冷水速凝后立即使用。否则溶于培养基中的空气会干扰观察发酵产酸的结果。

  本文节选自《常见细菌系统鉴定手册》第十四章。

 

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