(一)染剂
(1)石炭酸复红液
碱性复红(Basic Fuchsine,一品红) |
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乙醇饱和液(约10%) |
10ml |
石炭酸水溶液(5%) |
100ml |
两液相混摇匀备用。
(2)酸性乙醇
乙醇(95%) |
100ml |
浓盐酸 |
3ml |
(3)吕氏美蓝染液
美蓝(次甲基蓝、亚甲基蓝、甲烯蓝) |
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乙醇饱和液(约2%) |
30ml |
KOH水溶液(0.01%) |
100ml |
KOH 1% 1ml加水99ml即为0.01%的KOH |
将两液混合后备用。此液陈旧者效果更好。
(二)染色步骤
(1)按常规制涂片;
(2)滴加石炭酸复红于玻片上,并于玻片下缓缓加热,使染液冒蒸气但不沸腾,并继续滴加染液,不使涂片上染液蒸干,这样保持5min;
(3)涂片冷后,倾去染液,用酸性乙醇脱色到无红色染剂洗脱为止;
(4)彻底水洗;
(5)用吕氏美蓝复染2~3 min;
(6)水洗、 吸干、镜检。
(三)观察结果
镜检时抗酸性细菌菌体呈红色,即抗酸染色阳性,非抗酸性细菌性呈蓝色。
本文节选自《常见细菌系统鉴定手册》第十二章。
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