(一)方法一
(1)染色剂:绘图墨汁;0.5%番红溶液,纯甲醇;
(2)染色步骤:在载片一端滴一滴无菌水,取少许菌苔在水滴中制成悬液。取一滴墨汁与菌悬液混合,并用另一载片之一端将此水滴在载片上刮成薄膜,风于。用纯甲醇固定1 min。加0.5%番红液数滴滴于涂片上,冲去残余甲醇,并染30s,然后倾去染液,立即吸于,备镜检。
(3)镜检;背景黑色,荚膜无色,细胞红色。
(4)注意事项:经比较,沪光绘图墨水(上海墨水厂)较好;北京绘图碳素墨水(北京墨水厂)颗粒太粗;北京墨汁(北京墨汁厂)胶性太大。
(二) 方法二
1.染色剂
刚果红(Congo red) |
2%水溶液 |
明胶 |
0.01%~0.1%水溶液 |
盐酸 |
1% |
吕氏美蓝:乙醇美蓝饱和液(约2%) |
30ml |
KOH水溶液(0.01%) |
100ml |
2.染色步骤
将刚果红水溶液和明胶水溶液各一滴滴于干净的载玻片上;用接种环醮取细菌培养物或悬浮液在玻片上与上述两滴溶液混匀并风干;滴加1%的盐酸冲洗,使图片呈蓝色;用蒸馏水漂洗,除去盐酸;用美蓝复染1min,风干后镜检。
3.镜检
(1)有荚膜的菌,菌体蓝色,荚膜不着色,背景蓝紫色;
(2)无荚膜的菌,菌体蓝色,背景蓝紫色。由于干燥菌体收缩,菌体四周也可能有一圈狭窄的不着色环,但这不是荚膜。荚膜的不着色部分宽。
4.注意事项
(1)荚膜的产生与培养基有关,所以应选用合适的培养基。在报告结果时应注明所用的培养基。
(2)有些动物致病菌仅在动物体内生长时形成荚膜,而在培养基中培养时不形成荚
(3)不同的种,产生荚膜的时间不尽相同,必要时可在不同时间观察。
(4)有时菌体着色差。
本文节选自《常见细菌系统鉴定手册》第十二章。
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