李斯特氏菌显色培养基是青岛高科园银河澳门官网入口技术有限公司研制,可快速检测食品和药品中单增李斯特氏菌。阴性结果可在3天内检测完成。单增李斯特氏菌显蓝色,菌落周围有一不透明环。蛋白胨提供氮源和氨基酸,氯化钠维持渗透压,琼脂是凝固剂,氯化锂抑制革兰氏阴性菌生长,抑菌剂抑制除李氏菌外的革兰氏阳性菌生长。
成份(g/L)
基础培养基:
营养物质
70.0
显色剂
6.0
pH 7.2±0.2 25℃
李斯特氏菌添加剂6.0g 、李斯特氏菌抑菌剂(冻干粉)1ml*5支 (已配套,无需另购)
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
用法
称取基础培养基 14.2g 加入 180ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取 1.2g 李斯特氏菌添加剂,加入 20ml 无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动 1-2min,使其混合均匀,将二者分别于 121℃ 高压灭菌 15 min。冷至 50℃ 左右时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入复溶后的李斯特氏菌抑菌剂1 支,混匀,倾入无菌平皿。使培养基的厚度约为 2-3mm,这样有利观察不透明环。
注: 培养基中有少量金属盐,灭菌后可能出现微量沉淀。
操作步骤
使用前,把制备好的培养基放置室温 10-20 分钟。
1、按SN标准、GB标准、FDA标准、ISO标准或其它标准制备样品液;
2、把样品液加入李氏增菌肉汤(LB1、LB2)中增菌;或把样品液和Half-Fraser增菌液按照 1:10 的比例混匀,30℃ 培养 24 小时;或其它增菌液中增菌培养;
3、取一环增菌液划线接种到李斯特氏菌显色培养基上,36℃±1℃ 培养 24-48 小时。
质量控制
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的平板呈不透明乳白色培养基。
2、微生物试验
质控菌株
ATCC
生长情况
菌落颜色
不透明环
单增李斯特氏菌
19114
+++
蓝色
+
绵羊李斯特氏菌
CICC21663
+++
蓝色
+
斯氏李斯特氏菌
CICC21671
+++
蓝色
-
金黄色葡萄球菌
25923
-
-
-
大肠埃希氏菌
25922
-
-
-
鼠伤寒沙门氏菌
14028
-
-
-
黑曲霉
16404
-
-
-
典型特征
单增李斯特氏菌 36℃±1℃ 培养 24-28 小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。绵羊李斯特氏菌 36℃±1℃ 培养 48 小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。斯氏李斯特氏菌 36℃±1℃ 培养 24-48 小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围没有不透明环。在食品检测中绵羊李斯特氏菌非常少见。
贮存
制备好的固体平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8℃。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意
此培养基仅供实验室使用。
参考文献
1、VAN NETTEN, P., PERALES, J., VAN DE MOOSDIJK, A., CURTIS, G.D.W., a. MOSSEL, D.A.A.: Liquid and solid selective differential media for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes. Int. Food Microbiol., 8; 299-316 (1989).
2、HAMMER, G., HAHN, G., KIRCHHOFF, H., a. HEESCHEN, W.: Vergleich der Eignung von Oxford- und PALCAM-Medium zur Isolierung von Listeria monocytogenes aus Weichkse. Dtsch. Milchwirtschaft, 41; 334-336 (1990).
李斯特氏菌的初步检测 http://www.shchuhu.com/asphtml/video38.htm
李斯特氏菌显色平板的制备 http://www.shchuhu.com/asphtml/video24.htm
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不同细菌在 李斯特氏菌显色培养基上的生长特征:
李斯特氏菌显色培养基1000ml的 微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置37℃需氧培养24-48小时。
李斯特氏菌显色培养基原理和使用方法 http://www.shchuhu.com/asphtml/refere10566.htm