中文名:4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷
英 文:4 Nitrophenyl(PNP)α-D-glucopyranoside
用 途:用于克罗诺杆菌的快速鉴定
标准依据:ISO 22964:2017 食品链微生物学-克罗诺杆菌属基准检验方法
实验方法及作用:
在纯菌的悬液中加入4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷,37℃水浴培养4h后,于405nm处测定吸光度。有研究发现,大约8%的克罗诺杆菌不能在TSA上产黄色色素。而且在TSA上培养需要48h是为了观察黄色素的产生,作为目的菌判断的补充实验,这在一定程度上可能存在漏检的可能,并降低了鉴定的工作效率。
实验准备:
安瓿瓶:从包装盒中取出安瓿瓶,朝易折点(瓶颈上方蓝点)反方向用力折开安瓿瓶:或用砂轮划一圈安瓿瓶瓶颈,然后用力折开安瓿瓶,插入安瓿瓶架中,如果染菌或变色,则不能使用,重新拿一支。
试管:从包装盒中取出试管,插入试管架中,如果染菌或变色,则不能使用,重新拿一支。
注:折开安瓿瓶时最好包裹纱布,以免划伤手指。
接种方法:用接种环挑取单个纯化可以菌落至2ml无菌0.85%生理盐水中,制成均一浑浊的菌悬液,将2ml菌悬液加入至PNPG试剂中,37℃水浴培养4h。培养结束后,以加入2ml无菌生理盐水的PNPG试剂管为空白对照,在405nm波长处测OD值。
α-葡萄糖苷酶试验在克罗诺杆菌鉴定中的应用:http://www.shchuhu.com/xiazai-download.asp?id=137