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培养基
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改良罗氏培养基基础

英文名称:L-G medium Base,Modified
产品货号:HB6250-1
产品规格:250g
产品价格:90元
保质期:三年
产品用途:用于结核杆菌的培养
备  注:

产品介绍:

用途:用于结核杆菌的分离培养。

成分(g/ 600ml):

磷酸二氢钾
2.4
硫酸镁
0.24
柠檬酸镁
0.6
L-谷氨酸钠
7.2
孔雀绿
0.4
马铃薯淀粉
30.0

用法

称取本品49.84g,并吸取甘油12ml,加热搅拌溶解于 600ml蒸馏水中,煮沸5-10分钟,121℃高压灭菌15分钟取出。待冷至55℃左右时,以无菌操作加入无菌搅匀的全蛋液1000ml,混匀 ( 避免产生气泡 ),分装18mm×180mm试管,每管7ml,置成长斜面 ,用 85-90℃流动蒸汽 1-1.5小时后,取出,放冷,备用。

注:培养基中含较多马铃薯淀粉,呈浑浊状。

用法详解:

(1)基础培养基:称取除全蛋液以外的成分加热煮沸溶解于600mL纯化水中,加热过程需不停搅拌以防止马铃薯粉凝成块或糊底,121℃灭菌15min,冷却至55℃备用;

(2)全蛋液制备:将新鲜鸡蛋洗刷外壳后,浸于5%碳酸钠溶液中约30min,用清水冲洗后,浸泡于75%乙醇溶液中数分钟,在无菌环境中用灭菌的镊子或其他器具打破蛋壳,将蛋液倒入含玻璃珠的无菌锥形瓶中(可预先将玻璃珠放入锥形瓶中,121℃高压蒸汽灭菌15-30min),充分摇晃使蛋黄、蛋白摇散混合均匀。

注:新鲜鸡蛋内的蛋液通常是无菌的,无须进行灭菌处理,操作过程应注意避免污染。若蛋液中可能残存蛋壳碎渣,可将打散后的全蛋液用无菌纱布进行过滤。

(3)将1000mL全蛋液与600mL基础溶液混合充分摇匀,无菌分装于灭菌的试管中,每管5-7mL(视试管的大小调整装量),摆长斜面,用85-90℃流动蒸汽灭菌1-1.5h至斜面完全凝固,取出冷却后备用。制备好的罗氏培养基斜面应呈微绿色或黄绿色。

注:不同于一般的培养基,此培养基中不使用琼脂,而是通过蛋液的凝固效果制成固体培养基,因此硬度较低,且分枝杆菌生长周期长,为防止培养基过分失水变干,通常使用试管制成斜面使用而不是做成平板(平板通常培养3-5天后会有明显失水变薄现象,而分枝杆菌通常需要培养数周的时间)。将蛋液与基础培养基混合时,应缓慢倒入轻轻摇匀,防止产生过多气泡。85-90℃的流动蒸汽可以保持蛋液中的维生素不被破坏,也可使用凝固器加温至85-90℃,若无流动蒸汽灭菌器和凝固器,也可使用烘箱调节至85-90℃使培养基凝固。

改良罗氏培养基基础(GB)微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养14-28天。

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